細(xì)胞培養(yǎng)的常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法

更新時(shí)間：2023-10-26

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　　你知道細(xì)胞培養(yǎng)的常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！

　　一、培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁

　　原因：

　　1.胰蛋白酶消化過(guò)度；

　　2.支原體污染；

　　解決方法：

　　1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度；

　　2.分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物；

　　二、懸浮細(xì)胞成簇

　　原因：

　　1.培養(yǎng)液中含鈣,鎂離子；

　　2.支原體污染；

　　3.蛋白酶過(guò)度消化使得細(xì)胞裂解；

　　解決方法：

　　1.用無(wú)鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞，輕巧吹吸

　　2.細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液；

　　3.分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體；

　　三、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢

　　原因：

　　1.由于更換不同培養(yǎng)液或血清；

　　2.培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必須成分如谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子耗盡或缺乏或已被破壞；

　　3.培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；

　　解決方法：

　　1.比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)，讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；

　　2.換入新鮮配置培養(yǎng)液，或補(bǔ)加谷氨酰胺及生長(zhǎng)因子；

　　3.用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，丟棄培養(yǎng)物；

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